вопросы по исследованию      
   системы гемостаза
горячая линия (044)233-09-19
Комплексное оснащение лабораторий гемостаза,
 профессиональный подбор аппаратуры и реагентов.
         Продажа и сервис
                  тел.
044 - 233 09 19
        моб. тел. 050 - 213 09 19
                             063 - 233 09 19
е-mail:
info@haemostasis.com.ua
Волчаночный антикоагулянт
  Назначение
Тест с разбавленным ядом гадюки Рассела (DRVVT - Diluted Russell's Viper Venom Test) предназначен для
определения волчаночных антикоагулянтов (тип антител, взаимодействующих с фосфолипидами) в
человеческой цитратной плазме.
ВА Скрининговый тест (LAC Screen): содержит разбавленный яд гадюки Рассела (DRVV реагент) и
предназначен для скринингового исследования наличия волчаночных  антикоагулянтов.
ВА Подтверждающий тест (LAC Confirm): содержит богатый фосфолипидами разбавленный яд    гадюки
Рассела и предназначен для подтверждения наличия волчаночных антикоагулянтов. Тесты назначают
пациентам с удлиненным временем АЧТВ неизвестной этиологии.
Принцип метода
Волчаночные антикоагулянты (ВА) относятся к группе антифосфолипидных антител, направленных
против отрицательно заряженных фосфолипидов или фосфолипидных комплексов с белками (бета-2-гликопртеином 1, либо
факторами свертывания, например, протромбином).
Обнаруженные по своей способности удлинять время фосфолипид-зависимых тестов (АЧТВ, КСТ, DRVVT) эти антитела относят к ВА. У пациентов с ВА
повышен риск клинических осложнений, таких как тромбоз и упорное невынашивание беременности. ВА Скрининговый и ВА Подтверждающий тесты
представляют собой оптимизированные реагенты, содержащие  разбавленный яд гадюки Рассела DRVV, и предназначены для упрощения и стандартизации
процесса определения ВА в клинических исследованиях. ВА Скрининговый реагент беден фосфолипидами, что делает его чувствительным к ВА.
Дополнительное количество фосфолипидов в ВА Подтверждающем реагенте нейтрализует ВА, что приводит к сокращению времени свертывания плазмы.
Яд гадюки Рассела в присутствии кальция напрямую активирует фактор X (в исследуемом образце). ВА Скрининговый и ВА Подтверждающий тесты, таким
образом, не зависят от аномалий контактного фактора, дефицита факторов VII, VIII и IX и их ингибиторов. Влияние гепарина до концентрации 1 Ед\мл
нейтрализуется полибреном. В результате ВА Скрининговый и ВА  Подтверждающий тесты являются более специфичными для оценки ВА, чем АЧТВ.
  Сбор и подготовка образцов
Девять частей свежей венозной крови собирают в пробирку с одной частью тринатрий цитрата.
Дальнейшая подготовка и хранение образца согласно международной инструкции NCCLS H21-A3.
При замораживании плазмы из остатков тромбоцитов высвобождаются фосфолипиды, которые могут сокращать время свертывания в тесте ВА скрининговый.
Перед замораживанием плазмы для удаления остаточных тромбоцитов требуется двойное центрифугирование или фильтрация через фильтр 0,2 микрона.
  Контроль качества
Для выполнения полной программы контроля качества рекомендуется использовать нормальный и
патологический контроли. Каждая лаборатория должна вывести свои собственные значения среднего отклонения и стандартной девиации и выполнить
программу контроля качества для мониторинга правильности выполнения лабораторных анализов. Контрольные измерения необходимо проводить не реже, чем
через каждые 8 часов работы в соответствии с правилами лабораторных исследований. За дополнительной информацией обратитесь к
 Руководству по эксплуатации прибора. Для оценки результатов и принятия решений при выходе результатов за допустимые
пределы, следуйте правилу Вестгарда (Westgard et al).
  Результаты
Для расчета отношений Скрининговое ВА и Подтверждающее ВА необходимо выполнить следующее: 1. Каждый раз при запуске в работу нового лота наборов ВА
Скрининговый и ВА Подтверждающий, согласно международному стандарту NCCLS H21- A3, Том 18, No. 20
необходимо установить диапазон нормальных значений для этих тестов.
2. Определите среднее для каждого нормального диапазона в секундах.
3. Среднее нормального диапазона является постоянным знаменателем в расчетах отношений.
ВА Скрининговый тест
1. Результат анализа в секундах делят на среднее нормального диапазона ВА Скрин.
Скрининговое ВА отношение = Образец Скрининговый тест (сек)/Среднее норм. диапазона скрин (сек)
2. Если время свертывания образца в ВА Скрининговом тесте попадает в диапазон нормальных значений, то  дальнейшего исследования на ВА как правило не
требуется.
3. Если время свертывания образца в ВА Скрининговом тесте на 20% превышает среднее нормального диапазона ВА Скрин (т.е. отношение >1,2), присутствие ВА
должно быть подтверждено ВА Подтверждающим тестом.
ВА Подтверждающий тест
1. Результат анализа в секундах делят на среднее нормального диапазона ВА Подтв.
Подтверждающее ВА отношение = Образец Подтверждающий тест (сек)/Среднее норм. диапазона подтв (сек)
2. Делением Скринингового ВА отношения на Подтверждающее ВА отношение получаем Нормализованное ВА отношение.
Нормализованное ВА отношение = Скрининговое ВА отношение/Подтверждающее ВА отношение
Интерпретация результатов
1. Конечный результат анализа выражается в Нормализованном ВА отношении:
Отнрошение > 2.0 ВА сильно выражены
Отнрошение 1.5 - 2.0 ВА умеренно выражены
Отнрошение 1.2 - 1.5 ВА слабо выражены
2. Если Норм ВА отношение < 1.2 и время ВА Скринингового теста и ВА Подтверждающего теста удлинено,  необходимо выполнить миксовый тест. Смешивание
нормальной и исследуемой плазмы приведет к восполнению дефицита любого фактора свертывания в исследуемой плазме.
  Ограничения метода/влияние других веществ
Иктеричные, липемичные и гемолизованные образцы могут иметь искаженные результаты исследования.
Предельно допустимые концентрации влияющих веществ в исследуемой плазме при работе на ACL Futura/ACL Advance коагулометрах:
гемоглобин - до 400 мг\дл, билирубин - до 20 мг\дл и триглицериды - до 295 мг\дл.
Предельно допустимые концентрации влияющих веществ в исследуемой плазме при работе на ACL коагулометрах:
гемоглобин - до 100 мг\дл, билирубин - до 21.7 мг\дл и триглицериды - до 329 мг\дл.
Различные методы выявления ВА основаны на различных свойствах ВА и поэтому имеют разную специфичность к конкретным подгруппам ВА. Чтобы исключить
присутствие в плазме ВА необходимо выполнить как минимум два различных скрининговых теста.
  Ожидаемые результаты
Изучение диапазона нормальных значений было выполнено с использованием наборов ВА Скрининговый тест/ВА Подтверждающий тест на коагулометрах фирмы IL. Нормализованное ВА отношение 0.8 - 1.2
Эти результаты были получены с использованием определенного лота реагентов. В силу наличия множества факторов, влияющих на время свертывания, каждая
лаборатория должна устанавливать свой собственный диапазон нормальных значений.