вопросы по исследованию
         системы гемостаза
горячая линия
(044) 233-09-19
         Продажа и сервис
                  тел.
044 - 233 09 19
        моб. тел. 050 - 213 09 19
                             063 - 233 09 19
е-mail:
info@haemostasis.com.ua
Комплексное оснащение лабораторий гемостаза,
 профессиональный подбор аппаратуры и реагентов.
                                                                              Инструкция к набору "Тромбиновое время."
Thrombin Clotting Time. Cat. No. 5377, 5392
Кат ном 5377 (10х5мл)  Кат ном 5392 (10х2мл)
I. Применение
Реагент для определения тромбинового времени (ТВ) Helena содержит бычий тромбин. Реактив можно использовать как для ручных методов, так и на полуавтоматических и автоматических анализаторах. Тест обычно применяется для выявления причин, связанных с нарушением свертывающей системы крови. Удлинение тромбинового времени  может быть качественным признаком аномального уровня фибриногена (высокого или низкого), или признаком наличия веществ типа FDP (продукты разрушения фибриногена) или гепарина. Количественная оценка возможных причин удлинения тромбинового времени должна быть выполнена вместе с такими исследованиями, как исследования АЧТВ или хромогенный анализ гепарина, фибриногена по Клауссу, определения продуктов деградации фибрина, определения гепарина методом нейтрализации протамин сульфатом или полибреном, нормальная плазма, смешивающая исследования или рептилазный анализ, чтобы различить гипофибриногенемию и эффекты продукта деградации фибрина.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для  диагностики in vitro. Не принимать внутрь!
При работе с любым из компонентов набора применяйте соответствующую защитную одежду. В реактивах не содержится антигенов к гепатиту B (HBsAg), Anti-HCV и HCV антителам. Рассматривайте реактивы как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры предосторожности.
III. Реактивы
1.    тромбин-реагент.
Каждый пузырек содержит лиофилизованный реактив, приготовленный из бычьего тромбина с добавлением буфера и стабилизаторов.
Разведенный реагент содержит приблизительно 3 единицы/мл тромбина. Внешне, до приготовления, реактив должен выглядеть как белая
плотная лиофилизовання субстанция.
Приготовление. Рразведите реактив с рекомендованным объемом очищенной воды (5мл для кат ном 5377 или 2мл для кат ном 5392). Подождите
5 минут, затем плавно перемешайте и перелейте в пластиковую пробирку. Разведенный реактив внешне должен выглядеть как прозрачный,
бесцветный раствор.
2.    Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит инструкцию для пользователя.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке.
1.    тромбин-реагент
 
Разведенный реактив должен храниться при 2ч6°C. Устойчив в течение 8 часов, на борту AC-4 в позиции 27 при  37°C - 6 часов.
V. Сбор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна быть собрана с
антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 % или 3.2 % цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования при 2000ч3000 об/мин в течение 15
минут. Плазма должна храниться при 2ч6°C. Тестирование должно быть закончено в течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может
быть заморожена при -20°C в течение 2 недель или при -70°C в течение одного месяца. Размораживать плазму для определения необходимо
быстро при 37°C. Не держать при 37°C более 5 минут.
VI. Пошаговое руководство
1.    Возьмите кровь и выполните приготовление образцов, как описано выше.
2.    Разведите плазму контроля согласно инструкции, вложенной в пакет реагентов.
3.    Подготовьте реактивы к использованию согласно инструкции, приведенной в разделе
Реактивы. Выполните все тесты в двойном
экземпляре. Вычислите среднее время свертывания.
Варьирование значений должно быть в пределах ± 5 % от среднего значения.
4.    С помощью пипетки отберите 0.2мл плазмы пациента или контроля в реакционную пробирку.
5.    Инкубируйте при 37°C в течение 3 минут.
6.    С помощью пипетки отберите 0.1мл реагента в реакционную пробирку, содержащую
плазму пациента или контроль.
7.    Таймер остановится автоматически при образовании сгустка.
8.    Выдавайте результаты с точностью до 0,1сек.
VII. Контроль качества
Каждой лаборатории необходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии работы анализатора и оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно считать недействительными.
Компания Helena рекомендует использовать следующие контроли качества:
кат ном
5186 Normo-Trol 1.
кат ном 5187 Ab-Trol 2.
кат ном 5183 Ab-Trol 3.
VIII. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный референсный диапазон.
IX. Интерпретация результатов
Результаты Тромбинового Времени выражаются в секундах, с точностью до 0,1. Нормальный диапазон (обычно среднее значение  ± 2 CV
(стандартных отклонения)) должен быть установлен в каждой лаборатории. Результаты вне нормального диапазона нужно рассматривать как
неправильные и нужно определять повторно.
X. Ограничения
Ожидаемые значения Тромбинового Времени могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используются в лаборатории для выполнения данного теста, а также от температуры, pH, типа антикоагулянта, метода взятия крови, времени и метода хранения образцов - все это очень важно. Сбор и хранение образцов плазмы должны быть стандартизированы и тщательно контролируемы. Неожиданные результаты должны быть подтверждены дополнительными исследованиями.
Также, удлинение тромбинового времени может наблюдаться у пациентов с множественным системным амилоидозом, осложненным с
кровотечениями,  эти осложнения могут быть вызваны циркулирующим ингибитором. Кроме того, терапевтические уровни гепарина могут
полностью исключить образование сгустка при выполнении теста Тромбиновое Время, несмотря на то,  что нейтрализация с протамином
сульфатом или полибреном должна исправить тромбиновое время.
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие параметры (в качестве примера):
Внутри дной аналитической серии.
время сверт., сек.         коэф. вар. внутри пробы, %        n
12.5                 1.43                    10
Между разными аналитическими сериями.
время сверт., сек.         коэф. вар. внутри пробы, %        n
12.5                 1.29                    10
 
XII. Литература
1.    Laposata et al. The Clinical Haemostasis Handbook, Yearbook Medical Publishers Inc., p219, 1989.
2.    Thompson, A.R. and Harker, L.A. Manual of Haemostasis and Thrombosis. 3rd Ed., F.A. Davis Co., p62, 1983.
3.    DeMott, W.R., in: Laboratory Test Handbook, 2nd Ed., Jacobs D.S. et al Eds., Lexi-Comp Inc., p432-433, 1990.
4.    Gastineau, D.A. et al. 'Inhibitor of the Thrombin Time in Systemic Amyloidosis: A Common Coagulation Abnormality' Blood, 1991, 77: 2637-2640.